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蛋白质分离色谱之凝胶色谱

发布日期:2015-06-09阅读次数:2588

蛋白质凝胶色谱介质是一些表面亲水性的多孔微球,主要是使用无配基的交联琼脂糖、葡聚糖基质介质;其他如改性大孔硅胶基质、改性大孔有机聚合物基质一般用于分析。理想的凝胶色谱基质在与样品接触部分不应有离子基团,尽可能少的疏水基团。

  大家知道,凝胶色谱分离机理是分子量大的能进入胶的大孔,进入浅,流出快;分子小的进入胶的大孔和较小的孔,进入深,流出慢。

  选择凝胶色谱介质要特别注意其排阻极限。下面为琼脂糖、葡聚糖基质凝胶色谱介质品种及性能表。

 

微球品种

排阻极限

耐压 MPa

应用

生产公司

琼脂糖 4B/CL4B/4FF

6  ~2000 

0.008/0.012/0.15

大分子

西安恒成,美国 GE

琼脂糖 6B/CL6B/6FF

1  ~400 

0.02/0.03/0.3

大分子

西安恒成,美国 GE

葡聚糖 25

1000~5000

0  15

脱盐,肽

西安恒成,美国 GE

葡聚糖 50

1000~30000

0  15

脱盐,肽,分子量测定

西安恒成,美国 GE

葡聚糖 75

3000~80000

0  15

小分子量蛋白质分离,分子量测定

西安恒成,美国 GE

Sephacryl s-100

10 3~10 5

0.2

 , 小蛋白

西安恒成,美国 GE

Sephacryl s-200

5 × 10 3~2.5 ×10 5

0.2

蛋白质

西安恒成,美国 GE

Sephacryl s-300

10 4~1.5 × 10 6

0.2

蛋白质

西安恒成,美国 GE

  凝胶色谱上样量较小;分辨率较差,分开的球形蛋白质分子量差异至少要在 30% 以上。

  多糖基质的凝胶色谱介质表面会有微量的羧基,流动相中要加少量盐抑制离子交换作用。凝胶色谱常用在分离工艺的末尾。